РНК-зв’язувальний білок SAM68 взаємодіє із білками ендоцитозу та модуляторами актинового цитоскелета

ЗаголовокРНК-зв’язувальний білок SAM68 взаємодіє із білками ендоцитозу та модуляторами актинового цитоскелета
Тип публікаціїJournal Article
Рік публікації2020
АвториПаньківський, СВ, Сенченко, НВ, Бусько, ПБ, Риндич, АВ
Abbreviated Key TitleDopov. Nac. akad. nauk Ukr.
DOI10.15407/dopovidi2020.05.103
Номер видання5
РозділБіологія
Нумерація сторінок103-109
Дата публікації5/2020
МоваАнглійська
Анотація

Метою дослідження було підтвердити можливість прямого зв’язування між SAM68 та ITSN1, проаналізувати вплив ITSN1 на SAM68-опосередкований альтернативний сплайсинг і виявити нових партнерів SAM68 з-поміж ендоцитозних білків та модуляторів реорганізації актинового цитоскелета. Взаємодії проаналізовано за допомогою pull-down методик з використанням очищених рекомбінантних білків або лізатів клітин 293. Нокдаун ITSN1 у клітинах лінії HeLa проводили, використовуючи дві шпилькові РНК. Експресію ізоформ, що утворюються в ході альтернативного сплайсингу, проаналізовано за допомогою ПЛР в реальному часі. Показано, що SAM68 прямо взаємодіє з ITSN1 in vitro. Далі виявлено, що нокдаун ITSN1 у клітинах лінії HeLa підвищує рівень збереження інтрону 3 SRSF1 на 50 %, сприяючи експресії протоонкогенної ізоформи SRSF1. Встановлено, що SH3 домени білків AMPH1, BIN1, CTTN1, TKS4 та TKS5 преципітують SAM68 із лізатів клітин 293. SAM68 безпосередньо зв’язується з ITSN1 і взаємодіє з ендоцитозними білками та модуляторами перебудов актинового цитоскелета, а SAM68-опосередкований сплайсинг у клітинах лінії HeLa може регулюватися ITSN1.

Ключові словаITSN1, SAM68, SRSF1, альтернативний сплайсинг