Заголовок | РНК-зв’язувальний білок SAM68 взаємодіє із білками ендоцитозу та модуляторами актинового цитоскелета |
Тип публікації | Journal Article |
Рік публікації | 2020 |
Автори | Паньківський, СВ, Сенченко, НВ, Бусько, ПБ, Риндич, АВ |
Abbreviated Key Title | Dopov. Nac. akad. nauk Ukr. |
DOI | 10.15407/dopovidi2020.05.103 |
Номер видання | 5 |
Розділ | Біологія |
Нумерація сторінок | 103-109 |
Дата публікації | 5/2020 |
Мова | Англійська |
Анотація | Метою дослідження було підтвердити можливість прямого зв’язування між SAM68 та ITSN1, проаналізувати вплив ITSN1 на SAM68-опосередкований альтернативний сплайсинг і виявити нових партнерів SAM68 з-поміж ендоцитозних білків та модуляторів реорганізації актинового цитоскелета. Взаємодії проаналізовано за допомогою pull-down методик з використанням очищених рекомбінантних білків або лізатів клітин 293. Нокдаун ITSN1 у клітинах лінії HeLa проводили, використовуючи дві шпилькові РНК. Експресію ізоформ, що утворюються в ході альтернативного сплайсингу, проаналізовано за допомогою ПЛР в реальному часі. Показано, що SAM68 прямо взаємодіє з ITSN1 in vitro. Далі виявлено, що нокдаун ITSN1 у клітинах лінії HeLa підвищує рівень збереження інтрону 3 SRSF1 на 50 %, сприяючи експресії протоонкогенної ізоформи SRSF1. Встановлено, що SH3 домени білків AMPH1, BIN1, CTTN1, TKS4 та TKS5 преципітують SAM68 із лізатів клітин 293. SAM68 безпосередньо зв’язується з ITSN1 і взаємодіє з ендоцитозними білками та модуляторами перебудов актинового цитоскелета, а SAM68-опосередкований сплайсинг у клітинах лінії HeLa може регулюватися ITSN1. |
Ключові слова | ITSN1, SAM68, SRSF1, альтернативний сплайсинг |